Analisis Interaksi Biokimia Antigen-Antibodi pada Uji ELISA Untuk Deteksi Antibodi Rabies: Tinjauan Kimia Dalam Praktik Karantina Hewan

Meyla Pazya Paputungan, Netty Ino Ischak, Kristina Dwi Wulandari

Abstract


Rabies merupakan penyakit zoonosis yang bersifat fatal dan masih menjadi ancaman global bagi hewan dan manusia. Deteksi antibodi rabies pada hewan peliharaan seperti kucing menjadi bagian penting dalam proses karantina hewan, khususnya untuk menjamin status kesehatan sebelum dilalulintaskan. Penelitian ini bertujuan untuk menganalisis hasil uji ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) terhadap antibodi rabies pada sampel serum kucing di balai karantina, hewan, ikan dan tumbuhan gorontalo periode bulan april 2025 serta mengkaji secara kimiawi interaksi antigen–antibodi dan reaksi enzim-substrat yang terjadi selama proses pengujian. Pengujian dilakukan berdasarkan standar SNI ISO/IEC 17025 dengan metode sesuai protokol uji pada ELISA KIT Rabies yang digunakan. Nilai Equivalen Unit (EU) dari lima sampel serum kucing yang diuji menunjukkan hasil ≥ 0,5 EU yang diinterpretasikan nilai titer antibodi protektif terhadap virus rabies. Pembacaan hasil dilakukan menggunakan ELISA reader pada panjang gelombang 405 nm. Dari sisi kimia, intensitas warna dalam ELISA ditentukan oleh reaksi antara enzim horseradish peroxidase (HRP) dan substrat TMB (3,3',5,5'-tetramethylbenzidine) yang menghasilkan perubahan warna sebagai indikator konsentrasi antibodi. Penelitian ini menekankan pentingnya pemahaman terhadap parameter kimia seperti pH, suhu, waktu inkubasi, dan konsentrasi reagen, untuk memastikan sensitivitas dan akurasi ELISA dalam praktik karantina hewan.
Kata kunci: Rabies; ELISA; HRP; Antigen; Antibodi; substrat TMB

References


Alshawafi, W. M., Aldhahri, M., Almulaiky, Y. Q., Salah, N., Moselhy, S. S., Ibrahim, I. H., El-Shishtawy, R. M., & Mohamed, S. A. (2018). Immobilization of horseradish peroxidase on PMMA nanofibers incorporated with nanodiamond. Artificial Cells, Nanomedicine and Biotechnology, 46(sup3), S973–S981. https://doi.org/10.1080/21691401.2018.1522321

Aydin, S., Emre, E., Ugur, K., Aydin, M. A., Sahin, İ., Cinar, V., & Akbulut, T. (2025). An overview of ELISA: a review and update on best laboratory practices for quantifying peptides and proteins in biological fluids. In Journal of International Medical Research (Vol. 53, Issue 2). SAGE Publications Ltd. https://doi.org/10.1177/03000605251315913

Cai, D., Fraunfelder, M., & Chen, S. Y. (2022). Blood serum analysis: A modified sandwich enzyme-linked immunosorbent assay protocol. MethodsX, 9. https://doi.org/10.1016/j.mex.2022.101923

Carducci, M., Massai, L., Lari, E., Semplici, B., Grappi, S., Maria, N., Jones, E., Conti, V., Piu, P., Scorza, F. B., Iturriza-Gómara, M., Montomoli, E., Pollard, A. J., Rondini, S., & Rossi, O. (2024). Development and characterization of high-throughput serological assays to measure magnitude and functional immune response against S. Paratyphi A in human samples. Frontiers in Immunology, 15. https://doi.org/10.3389/fimmu.2024.1443137

Fitria, Y., Febrianto, N., Putri, R. E., Rahmadani, I., & Subekti, D. T. (2023). Evaluation of In-House ELISA for Antirabies Antibodies Detection in Domestic Canine. Veterinary Medicine International, 2023. https://doi.org/10.1155/2023/4096258

Gelolodo, M. A., Tangkonda, E., Wuri, D. A., Sanam, M. U. E., Mikrobiologi, B., Hewan, D. P., Kesehatan, D., Veteriner, M., Hewan, K., Kedokteran, F., Cendana, N., Kesmavet, B., Epidemiologi, D., Adisucipto, N. J., & Kupang, K. (n.d.). REVIEW: RABIES VIRUS (RABV) DAN PATOGENESISNYA (Vol. 28).

Klaudius, Y., Gelolodo, M. A., Winarso, A., Hewan, P., Kesehatan, D., Veteriner, M., & Hewan, K. (n.d.). EVALUASI EFEKTIFITAS VAKSINASI RABIES PRIMER PADA ANJING DI KECAMATAN MAGEPANDA KABUPATEN SIKKA. http://ejurnal.undana.ac.id/jvnVol.3No.1

Limbong, F., Sembiring, S. K., Harahap, F., Edi, S., & Sipahutar, H. (2025). Analisis Karakteristik Pasien dan Pemberian Vaksin Anti Rabies (VAR) pada Kasus Gigitan Hewan di Puskesmas Kota Medan pada Tahun 2024. JURNAL BIOSHELL, 14(1), 160–169. https://doi.org/10.56013/bio.v14i1.3963

Murtini, S., Anindita Rotinsulu, D., Ridwan, Y., Widaya Lukman, D., Zahid, A., Wicaksono, A., Afiff, U., Hilaliah, A., Akla Velayati, R., Sudarnika, E., Santoso, K., Wijaya, A., Ilmu Penyakit Hewan dan Kesehatan Masyarakat Veteriner, D., Kedokteran Hewan, F., Pertanian Bogor, I., Sarjana Kedokteran Hewan, P., Anatomi, D., Farmakologi, dan, Klinik, D., & Patologi, dan. (2022). Seroprevalensi Rabies Pascavaksinasi pada Populasi Anjing di Kawasan Endemik Rabies di Kabupaten Sukabumi (Post-vaccination Rabies Seroprevalence in Dog Populations in Rabies Endemic Areas in Sukabumi Regency). http://www.journal.ipb.ac.id/indeks.php/actavetindones

Putu, I., Tirta Cahyana, A., & Narayani, I. (2021). Deteksi Level Antibodi Pada Serum Darah Anjing Kintamani Pasca Vaksinasi Rabies Dengan Direct ELISA Detection of Antibody Levels in Blood Sera of Kintamani Dog Post Vaccination of Rabies With Direct ELISA. Journal of Biological Sciences, 8(1), 172–177. https://doi.org/10.24843/metamorfosa.2020.v08.i01.p019

Santosa, B. (2020). TEKNIK ELISA Metode Elisa Untuk Pengukuran Protein Metallothionein Pada Daun Padi Ir Bagendit.

Santoso, K., Herowati, U. K., Rotinsulu, D. A., Murtini, S., Ridwan, M. Y., Hikman, D. W., Zahid, A., Wicaksono, A., Nugraha, A. B., Afiff, U., Wijaya, A., Arif, R., Tarigan, R., & Sukmawinata, E. (2021). COMPARISON OF COLORIMETRIC-BASED RABIES POSTVACCINATION ANTIBODY TITER DETECTION USING ELISA READER AND MOBILE PHONE CAMERA. Jurnal Veteriner, 22(1), 79–85. https://doi.org/10.19087/jveteriner.2021.22.1.79

Saud Al-Bagmi, M., Shahnawaz Khan, M., Alhasan Ismael, M., Al-Senaidy, A. M., Ben Bacha, A., Mabood Husain, F., & Alamery, S. F. (2019). An efficient methodology for the purification of date palm peroxidase: Stability comparison with horseradish peroxidase (HRP). Saudi Journal of Biological Sciences, 26(2), 301–307. https://doi.org/10.1016/j.sjbs.2018.04.002

Setiawaty, V., Septiawati, C., & Burni, E. (2019). Karakteristik Kasus Fatal Akibat Gigitan Hewan Penular Rabies di Indonesia 2016 – 2017. Media Penelitian Dan Pengembangan Kesehatan, 29(3), 235–242. https://doi.org/10.22435/mpk.v29i3.1022

Tang, Z., Chen, H., He, H., & Ma, C. (2019). Assays for alkaline phosphatase activity: Progress and prospects. In TrAC - Trends in Analytical Chemistry (Vol. 113, pp. 32–43). Elsevier B.V. https://doi.org/10.1016/j.trac.2019.01.019

Telleng, P. A., Santosa, B., & Kartika, A. I. (2023). Comparison of HCG Levels in Reagents Temperature 25°C and 8°C Using ELISA Method. Medicra (Journal of Medical Laboratory Science/Technology), 6(1), 10–14. https://doi.org/10.21070/medicra.v6i1.1709

Veteriner, B., Halaman, F., Restika, K. D., Setyorinie, E. I., Wahyuri, I. B., Veteriner, B. B., & Pusvetma, F. (n.d.). PEMBUATAN ANTIGEN RABIES UNTUK KIT ELISA RABIES TAHUN 2020-2022.

Walker, P. J., Freitas-Astua, J., Bejerman, N., Blasdell, K. R., Breyta, R., Dietzgen, R. G., Fooks, A. R., Kondo, H., Kurath, G., Kuzmin, I. V., Ramos-Gonzalez, P. L., Shi, M., Stone, D. M., Tesh, R. B., Tordo, N., Vasilakis, N., & Whitfield, A. E. (2022). ICTV Virus Taxonomy Profile: Rhabdoviridae 2022. Journal of General Virology, 103(6). https://doi.org/10.1099/jgv.0.001689




DOI: https://doi.org/10.37905/je.v21i1.33636

Refbacks

  • There are currently no refbacks.


Editorial Office

Department of Chemistry, Universitas Negeri Gorontalo
Jl. Prof. Dr. Ing. B. J. Habibie, Moutong, Tilongkabila, Bone Bolango 96554, Gorontalo, Indonesia

E-mail: [email protected]

+6285341773856 (Call/sms/wa)

Jurnal Entropi (JE) (p-ISSN: 1907-1965| e-ISSN: XXX-XXXX) by Department of Chemistry Universitas Negeri Gorontalo. This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License. Powered by Public Knowledge Project OJS